Caracterización de geles y desarrollo de algoritmos para el análisis digital del desplazamiento de partículas fluorescentes para su aplicación en microscopía de fuerzas de tracción

Tremolada Castrat, Stefano (2017). Caracterización de geles y desarrollo de algoritmos para el análisis digital del desplazamiento de partículas fluorescentes para su aplicación en microscopía de fuerzas de tracción. Proyecto Fin de Carrera / Trabajo Fin de Grado, E.T.S.I. Telecomunicación (UPM), Madrid.

Descripción

Título: Caracterización de geles y desarrollo de algoritmos para el análisis digital del desplazamiento de partículas fluorescentes para su aplicación en microscopía de fuerzas de tracción
Autor/es:
  • Tremolada Castrat, Stefano
Director/es:
  • Plaza Baonza, Gustavo
Tipo de Documento: Proyecto Fin de Carrera/Grado
Grado: Grado en Ingeniería Biomédica
Fecha: 2017
Materias:
Palabras Clave Informales: Microscopía de fuerzas de tracción (TFM), poliacrilamida (PAA), células Dictyostelium discoideum, colágeno, fibroína, módulo elástico
Escuela: E.T.S.I. Telecomunicación (UPM)
Departamento: Ciencia de los Materiales
Licencias Creative Commons: Reconocimiento - Sin obra derivada - No comercial

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Resumen

El presente trabajo persigue el desarrollo y puesta a punto de la técnica de microscopía de fuerzas de tracción en el Laboratorio de Biomateriales del Centro de Tecnología Biomédica, de la Universidad Politécnica de Madrid, con la finalidad de estudiar las fuerzas de adhesión y dinámica de células sobre sustratos con diferentes superficies proteicas. Por tanto, el proyecto versa sobre el análisis de los desplazamientos de partículas fluorescentes inyectadas en un sustrato compuesto principalmente por gel de poliacrilamida y una capa de proteínas, fibroína o colágeno, en distintas proporciones. Dichos desplazamientos son causados por las fuerzas de adhesión y de movimiento de las células adheridas a la capa proteica del sustrato. El proyecto consta de dos partes bien diferenciadas: una parte experimental y otra de análisis computacional de los desplazamientos y la distribución de fuerzas sobre la superficie. La parte experimental incluye todo el proceso de síntesis de los geles y ensayos de compresión de los mismos para medir su módulo elástico, así como adición de las proteínas y las partículas fluorescentes, y el cultivo de las células. Por último se ha llevado a cabo la visualización de las células adheridas mediante el uso de microscopio y la toma de sucesivas imágenes de las partículas fluorescentes para el posterior análisis de su desplazamiento. Todo este bloque se ha llevado a cabo en colaboración con la alumna Eloïse Millet cuyo TFG ha abordado más en profundidad este tema. El análisis computacional se ha realizado utilizando el programa MATLAB, creando un algoritmo que permita identificar las partículas de todas las imágenes previamente tomadas con el microscopio, y calcular los desplazamientos de las mismas a partir de una primera imagen que servirá de referencia. Para ello, se calcula la posición de los centroides de todas las partículas fluorescentes de cada imagen y se obtienen los desplazamientos considerando que la imagen de referencia contendrá la posición inicial de las partículas. Con la metodología desarrollada en este trabajo, basado en trabajos previos del laboratorio, será posible obtener una estimación de las fuerzas de adhesión que ejercen las células en futuros estudios.

Más información

ID de Registro: 47514
Identificador DC: http://oa.upm.es/47514/
Identificador OAI: oai:oa.upm.es:47514
Depositado por: Biblioteca ETSI Telecomunicación
Depositado el: 29 Ago 2017 05:20
Ultima Modificación: 29 Ago 2017 05:20
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